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科学家为了研究一种蜂鸟β-球蛋白基因的功能,将该基因导人到大肠杆菌(菌落为白色)
科学家为了研究一种蜂鸟β-球蛋白基因的功能,将该基因导人到大肠杆菌(菌落为白色)
题库
2022-08-02
96
问题
科学家为了研究一种蜂鸟β-球蛋白基因的功能,将该基因导人到大肠杆菌(菌落为白色)细胞进行复制和表达,如下图。所使用的质粒中有和lacZ两种标记基因,前者让受体细胞具有抗氨苄青霉素的能力,后者表达的半乳糖苷酶会使一种被称为X-gal的物质呈现蓝色。
(1)将蜂鸟的B-球蛋白基因导人大肠杆菌,需要先用______(相同/不同)的限制性内切酶处理蜂鸟的DNA和载体质粒,在用________酶进一步处理以得到重组质粒。(6分)(2)在将重组质粒导人大肠杆菌细胞之前,需要用_______(填物质名称)处理大肠杆菌,使之转化为能够吸收周围环境中DNA分子的__________细胞。(6分)(3)使用添加了氨苄青霉素和X-gal的培养基培养经上述处理的大肠杆菌,选择________的菌落培养,就获得了导人重组质粒的大肠杆菌。(3分)
选项
答案
解析
(1)将蜂鸟的β-球蛋白基因导入大肠杆菌前,需先构建基因表达载体,即先用同种限制酶处理蜂鸟的DNA和质粒,并用DNA连接酶酶进一步处理以期得到重组质粒;
(2)将目的基因导入微生物细胞常用感受态细胞法,即用Ca2+处理微生物细胞,使其处于易于吸收周围环境中DNA分子的感受态。
(3)质粒中有ampⅡ和lacZ两种标记基因,前者让受体细胞具有抗氨苄青霉素的能力,后者表达的半乳糖苷酶会使一种被称为X-gal的物质呈现蓝色。在构建基因表达载体时,ampⅡ基因完好,而lacZ基因被破坏,因此使用添加了氨苄青霉素和X-gal的培养基培养经上述处理的大肠杆菌,选择白色的菌落克隆培养,就获得了导入重组质粒的大肠杆菌。
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